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玉米赤霉烯酮快速试剂盒

简要描述:

RIDASCREEN® FAST Zearalenon采用竞争性的酶免疫分析法定量分析谷物饲料中的玉米赤霉烯酮。试剂盒中含有酶免疫分析法所用的所有的试剂。试剂盒可以进行48个试验,包括标准。定量分析要求使用酶标板读数仪(含450nm波长)。

更新时间:2017-07-10

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玉米赤霉烯酮快速试剂盒

订货号: R5502
产品名称: 玉米赤霉烯酮的快速检测
产品英文名称: FAST Zearalenon
包装: 48次检测
产品介绍: 如下
产品说明: 玉米赤霉烯酮的快速检测 (15分钟单克隆抗体

 

酶联免疫分析快速定量测定玉米赤霉烯酮毒素试剂盒 (产品编号:R550248德国R-Biopharm制造 (中文翻译件仅供参考,以试剂盒内附的英文原件为准)。

1. 用途

   RIDASCREEN® FAST Zearalenon采用竞争性的酶免疫分析法定量分析谷物饲料中的玉米赤霉烯酮。试剂盒中含有酶免疫分析法所用的所有的试剂。试剂盒可以进行48个试验,包括标准。定量分析要求使用酶标板读数仪(含450nm波长)。

2. 概要

玉米赤霉烯酮毒素是由镰刀菌属的真菌形成。玉米赤霉烯酮主要呈雌激素效应。因为雌激素的特性,玉米赤霉烯酮会导致血中雌激素增高,临床表现为动物繁殖能力下降症状。具有关报道,动物中以猪zui为敏感,同时牛、马、羊也受其影响。这种霉菌毒素来源于植物或动物食品,会潜在威胁人体健康。为了检测食物及饲料中的玉米赤霉烯酮,常用物理/化学的方法,诸如HPLC,DC和GC,但这些方法在样品准备上耗时长,需要昂贵的实验室设备,而用RIDASCREEN® FAST Zearalenon检测方法,则能快速、准确地检测谷物、饲料、啤酒中的玉米赤霉烯酮。

3.测定原理

测定的基础是抗原抗体反应。微孔板包被有针对玉米赤霉烯酮毒素小鼠IgG羊抗体。加入、玉米赤霉烯酮毒素抗体,酶标记物,标准或样品溶液。游离、玉米赤霉烯酮与酶标记物竞争、玉米赤霉烯酮抗体,同时、玉米赤霉烯酮毒素抗体与羊抗体连接。没有连接的酶标记物在洗涤步骤中被除去。将酶基质(过氧化尿素)和发色剂(四甲基联苯胺)加入到孔中并且孵育。结合的酶标记物将红色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色由蓝色变为黄色。在450nm处测量,吸收光强度与样品中的浓度成反比。

4.  提供的试剂

每一个盒中的试剂足够进行43个测量(附加5个标准分析孔),盒中的材料如下:

1 X 48孔板(6条X  8孔,可以拆分为单孔)包被有羊抗体

5 X 标准液, 1.3ml/瓶, 为玉米赤霉烯酮标准溶液

标准液浓度为:0ppb; 50ppb; 100ppb; 200ppb; 400ppb

1 X 呕吐毒素抗体溶液(3ml)兔单克隆,直接应用液 黑色帽

1 X 酶标记的玉米赤霉烯酮(3ml)直接应用液       红色帽

1 X 基质/发色剂(6ml) 为红色溶液              白色滴瓶

1 X 反应停止液1M硫酸(6ml)                  黄色滴瓶

样品浓度可以直接从标准曲线中读出,已经考虑了样品制备过程的稀释倍数为10。

5.  需要的材料但盒中不提供

----5.1设备

----微孔板酶标仪(450nm)定量分析用

----振荡器

----粉碎机

----50ul, 100ul, 1000ul微量加样器

----100ml量筒

----50ml 漏斗及容量瓶

----WhatmanNo1或相当的滤纸

5.2 试剂

---甲醇

---70%甲醇溶液:30ml蒸馏水或去离子水和70ml纯甲醇混合制备70%甲醇溶液。

----蒸馏或去离子水

6. 操作者应该注意之事项

----标准液含有玉米赤霉烯酮毒素,应特别小心

----使用过的玻璃容器及玉米赤霉烯酮溶液用pH7的次

   氯酸溶液(10%V/V)浸泡过夜

----反应停止液为1M硫酸,避免接触皮肤

----不要使用过了有效日期的试剂盒, 稀释或搀杂使用会引起 

   灵敏度的降低.

----不要交换使用不同批号的盒中试剂.

7. 储存条件

----保存试剂盒于2-80C.不要冷冻

----基质/发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下

----将不用的微孔板放进原 锡箔袋中并且与提供的干燥剂

  一起重新密封.

8. 试剂变质的迹象

红色的基质/发色试剂显蓝色,表明基质/发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度值小于0.6个单位 (A450nm<0.6)时,表示试剂可能变质

9. 样品处理 样品应当在暗处及冷藏保存)

----取5g粉碎的有代表性的样品与25ml 70%甲醇溶液混合

----强力振荡3分钟

----用Whatman No.1滤纸过滤

----取50ul稀释液进行分析

*根据需要可以增加样品量,但甲醇溶液的量也应相应增加 

10. 酶标免疫分析程序

10.1测定之前注意事项。

1. 使用之前将所有试剂回升至室温20-25oC)

2. 使用之后立即将所有试剂放回2-8 oC

3. 如果样品量大建议使用多通道移液器,在使用中不要让微孔干燥。

4. 在EIA分析中的再现性,很大程度上取决于洗板的*性,仔细按照推荐的洗板顺序操作是EIA测定程序中的要点。

5. 在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖子盖住微孔。

10.2包被有抗体的微孔板条

锡箔袋沿横向压皱外边打开.取出需用数量的微孔板及框架, 将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封, 保存于2-80C.不要冷冻.

10.3标准液

玉米赤霉烯酮标准液为直接应用液,已经考虑了样品制备的10倍稀释,因此样品中的玉米赤霉烯酮毒素的浓度可以直接从标准曲线读出。

10.5测定程序,在20-25 oC条件下操作

1. 根据样品量将足够数量的孔条插入微孔架,记录样品及标准位置。

2. 加入50ul的标准或处理好的样品到各自的微孔中,每个标准和样品必须使用新的吸头。

3. 加入50ul酶标记物到微孔底部(红色盖)。( 注意移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体,避免交叉污染。)

4. 加入50ul抗体溶液(黑色盖)到每一个微孔底部,充分混合,在室温(20-25°C)孵育10(+/-1)分钟。(注意此操作步骤要快,尽量保持前后孔孵育时间的*,如果实验所用孔数量多,请用多通道移液器。移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体。)

5. 倒出孔中的液体,将微孔架倒置在吸水纸上拍打以保证完全除去孔中的液体.用洗瓶或多通道移液器将250ul蒸馏水加入孔中。再次倒出孔中的液体,完全除去孔中的液体,再重复操作洗涤步骤两次以上。(移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体,避免污染洗涤液造成洗板不彻底。洗板后要立即进行下一步操作,避免板孔干躁造成重复性差)

6.加入 2滴(或100ul)基质/发色试剂(白色滴瓶)到微孔

中, 充分混合并在室温(20-25°C 暗处孵育5(+/-0.5)分钟(注意此操作步骤要快,尽量保持前后孔孵育时间的*,使用多通道移液器加液,移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体。

7. 加入 2滴(或100ul)反应停止液(黄色滴瓶)到微孔中混合好, (注意此操作步骤要快,如果实验所用孔数量多,请将所需数量的滴瓶中液体转移至V型试剂槽中,并用多通道移液器加液。)在450nm处测量吸光度值以空气为空白,必须在加入停止液后10分钟内读取光度值

11. 结果

定量分析:所获得的标准和样品吸光度值除以*个标准(0标准)的吸光度值再乘以100.因此0标准等于100%并且以百分比给出吸光度值。

标准的吸光度值(或样品)

----------------------------------x 100=   %吸光度值

0标准的吸光度值

计算的标准值绘成为一个对应伏呕吐毒素浓度(ug/kg)的半对数坐标系统曲线图, 相对应每一个样品的浓度(ug/kg)可以从标准曲线上读出.

RIDASCREEN FAST Fumonisin标准曲线见英文原版说明书

仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准吸光度值的高低比较,判断样品浓度值是小于(吸光度高)还是大于(吸光度低)标准值。

目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准颜色深浅比较,判断样品浓度值是小于(颜色深)还是大于(颜色浅)标准值。特别注意请在步骤6中将在室温暗处孵育5分钟 更改为2-3分钟。

12.灵敏度

各种不同谷物和混合饲料的检测限为17~41ppb。定量检测限为50ppb(50ug/kg)。

r-Biopharm拜发公司, r-Biopharm Rhone LTD拜发罗恩公司

 各种霉菌毒素检测试剂盒及免疫亲和柱

AFLACARD B1黄曲霉毒素B1 快速检测卡 检测限可调整为2,5,10,15,20ppb

AFLACARD TOTAL总黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)快速检测

卡 检测限可调整为4,5,10,15,20,30ppb

Kobra Cell黄曲霉毒素B1,G1, 分析仪4秒钟得到结果

AFLAPLATE B1黄曲霉毒素B1 ELISA 试剂盒 单克隆抗体(1.5-50ppb)

AFLASCAN黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)单克隆抗体免疫亲和柱,半定量目测

AFLAPREP单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化,窄范围0-200ppb,检测限小于0.5ppb

EASI-EXTRACT AFLATOXIN单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测总黄曲霉毒素的样品纯化

总黄曲霉毒素单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化

总黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2,M1,M2)单克隆抗体ELISA方法

黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2) 快速检测  (15分钟) 定量分析, ELISA方法

黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2) 特快速检测  (5分钟) 半定量分析, ELISA方法

黄曲霉毒素B1 高灵敏度,检测限为0.625ppb, ELISA方法

AFLAPREP M单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测乳品中黄曲霉毒素M1的样品纯化,检测限小于5ppt

乳制品中的黄曲霉毒素 M1  高灵敏度), ELISA方法

乳制品中的黄曲霉毒素M1快速检测(15分钟), ELISA 方法

T - 2 毒素 高灵敏度), 单克隆抗体ELISA方法

FUMONIPREP伏马菌毒素单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测伏马菌毒素的样品纯化,范围100ppb-15000ppb

FUMONIPLATE伏马菌毒素, ELISA方法, 单克隆抗体

(0. 3-10ppm)

伏马菌毒素高灵敏度), ELISA方法

伏马菌毒素快速检测(15分钟), ELISA方法

赭曲霉毒素高灵敏度), ELISA方法

赭曲霉毒素快速检测(15分钟),单克隆抗体ELISA方法

赭曲霉毒素A单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测赭曲霉毒素 A 的样品纯化

OCHRAPREP单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测赭曲霉毒素 A 的样品纯化, 检测范围1-1000ppb, 检测限小于1ppb

OCHRASCAN 免疫亲和柱,半定量目测,检测限2ppb

玉米赤霉烯酮 高灵敏度), ELISA方法

玉米赤霉烯酮快速检测(15分钟),单克隆抗体ELISA方法

EASI-EXTRACT ZEARALENONE玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,用于检测玉米赤霉烯酮样品纯化

脱氧雪腐镰刀菌烯醇 高灵敏度), 单克隆抗体ELISA方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇快速检测 (15分钟), ELISA方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇特快速检测  (5分钟) 半定量分析, ELISA方法

红曲霉染色剂中的桔霉毒素快速检测(15分钟), ELISA方法

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