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总黄曲霉毒素检测卡

简要描述:

总黄曲霉毒素检测卡 10 个卡 密封于铝箔袋中,每卡可以测定两个样品20个样品纯化柱20个样品瓶,每瓶含有3ml样品稀释缓冲液1瓶洗涤缓冲液,4ml 绿色标签1瓶停止液,4ml 黄色标签2 个安瓶,含有冷冻干燥的酶标记物,红色标签1瓶酶标记物稀释缓冲液,5ml 粉色标签1个安瓶,含有5ml 底物,兰色标签20个滤液收集管20个有刻度的稀释管

更新时间:2017-07-22

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总黄曲霉毒素检测卡

总黄曲霉毒素检测卡    
订货号: P38
产品名称: 总黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)快速检测卡
产品英文名称: AFLACARD TOTAL
包装: 20次检测
产品介绍: 如下
产品说明:
总黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)快速检测
卡 检测限可调整为4,5,10,15,20,30ppb
AFLACARD TOTAL总黄曲霉毒素包括B1,B2,G1,G2 

产品编号:P38

检测卡定性测定黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2。检测限可以用稀释方法分别调整为4,5,10,15,20或30ppb,参见样品提取章节

使用说明书,使用前请仔细阅读,中文翻译件仅供参考

试剂盒组成,可以进行20个样品的测定

10 个卡 密封于铝箔袋中,每卡可以测定两个样品

20个样品纯化柱

20个样品瓶,每瓶含有3ml样品稀释缓冲液

1瓶洗涤缓冲液,4ml 绿色标签

1瓶停止液,4ml 黄色标签

个安瓶,含有冷冻干燥的酶标记物,红色标签

1瓶酶标记物稀释缓冲液,5ml 粉色标签

1个安瓶,含有5ml 底物,兰色标签

20个滤液收集管

20个有刻度的稀释管

需要的材料但盒子中不提供

实验室天平

刀片式均质器,带有1L容器罐

蒸馏水或去离子水

色谱级甲醇

Whatman N0113或 N04滤纸(可用国产定性或定量滤纸替代)

100ul, 0.5-1.0ml移液器及匹配的吸头

实验室玻璃容器

过滤漏斗

100ml及500ml量筒

烧杯

重要注意事项

避免危险

黄曲霉毒素是非常有害的物质,在实验中应当自始致终穿戴保护服装,包括橡胶手套,安全眼镜,实验大褂.

防止污染

所有使用过的材料及试剂必须经过次氯酸钠溶液(约5%W/W)浸泡至少30分钟,然后加入丙酮(5%V/V) 再浸泡30分钟.以达到消毒的目的. 重复使用的实验用具应当用清水冲洗干净后用蒸馏水彻底洗涤.

特别提示

1.不要使用过了有效期的试剂盒

2.不要混用不同批号的试剂,不要使用其他厂商的试剂代替.

3.试剂盒在使用之前应当回至室温(20-28OC),需要至少30分钟

4.避免试剂长时间在室温放置,取出所需要的试剂后,其余应立即密封好放回2-8OC

5.如果孵育时间与要求的不符,会导致结果不准确. 

6. 移液器吸头在使用之前应当用原液润湿

7.蒸馏水温度应当为室温(20-28OC)

储存

试剂盒应当在2-8OC保存,不要冷冻

效期

如果试剂盒是在2-8OC保存, 自生产之日起有十个月的效期。酶标记物复溶后在2-8OC保存,可稳定4个月

样品制备

应当按照认可的正式取样程序取样,以获得有代表性的样品。推荐zui少粉碎1公斤有代表性的样品,其中50g用于样品提取

用途及原理

AFLACARD TOTAL速测卡是定性酶免疫方法。这个筛选方法用于检测总黄曲霉毒素的含量是否等于或大于4,5,10,15,20或30ppb。

由于传统的黄曲霉毒素检测方法耗时长,成本高,已经不适应产品的常规检测。速测卡由于采用了单克隆抗体技术,因而具有特异性好,灵敏度高,快速,简单等优点

速测卡的关键组份是单克隆抗体联接在卡的膜上。接下来是毒素提取,样品过柱纯化或是在稀释前或是在稀释后,这主要取决于样品的种类。样品中的黄曲霉毒素被膜上的抗体结合,剩余的抗体空位与后加入的黄曲霉毒素酶标记物结合,然后洗涤膜以除去未结合的酶标记物。加入底物后,膜上结合有酶标记物的地方会显现紫色斑点。用于质控的紫色斑点确认实验进行正确。样品紫色斑点产生表明是阴性样品。加入反应停止液后,颜色反应会终止并留下*的实验记录(保存在黑暗处)。

测定程序

酶标记物的准备

加2ml酶标记物稀释缓冲液(粉色标签)到含有酶标记物的安瓶中(红色标签),复溶后使用前在室温(20-28OC)放置至少30分钟。如果不能当日消耗完,请转移到另一干净棕色可密封的瓶中,标记好内含物及复溶日期,在2-8OC保存。

酶标记物复溶后在2-8OC保存,可稳定4个月

样品提取

称50g精细粉碎了的样品,放入具有1L容量的均质器中。加入100ml 80%的甲醇水溶液(色谱级甲醇/蒸馏水, 80/20 V/V)。高速均质2分钟。用滤纸过滤提取物,收集至少10ml滤液。

花生,谷物样品的纯化及稀释

注意:花生/谷物样品应当在过柱纯化稀释

取5ml滤液加入纯化柱中(盒中已提供),用活塞加压滴速通过纯化柱并收集纯化液于收集管中(盒中已提供)。如果纯化液不清亮,请用同一根柱子再次过柱,但要降低速度。

确定了检测限后,根据表1取适量的纯化液及 80%甲醇加入到盒中已提供的刻度稀释管中,颠倒数次混合好。取1ml稀释了的纯化液转移到含有3ml样品稀释缓冲液的小瓶中,颠倒小瓶数次混合好。此液可以用AFLACARD TOTAL检测卡测定。

饲料及各种调味品的稀释及纯化

注意:饲料及各种调味品应当在过柱纯化稀释

确定了检测限后,根据表1取适量的滤液及 80%甲醇加入到盒中已提供的刻度稀释管中,颠倒数次混合好。取1ml稀释了的滤液转移到含有3ml样品稀释缓冲液的小瓶中,颠倒小瓶数次混合好。将瓶中液体转移入纯化柱中(盒中已提供),用活塞加压滴速通过纯化柱并收集纯化液于收集管中(盒中已提供)。如果纯化液不清亮,请用同一根柱子再次过柱,但要降低速度。此液可以用AFLACARD TOTAL检测卡测定。

表1

稀释体积配比

要求的

检测限

4ppb

5ppb

10ppb

15ppb

20ppb

30ppb

被稀释物

体积

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

0.5ml

80%甲醇

体积

1ml

1.5ml

4ml

6.5ml

9ml

7ml

AFLACARD TOTAL检测卡测定程序

注意:每卡有两个孔,因此每卡可以测定两个样品。第二个孔必须在*个孔用后的8小时内使用。每孔各有一个样品区和质控区

1. 试剂盒在使用之前从冰箱中拿出,回升至室温(20-28OC),需要至少30分钟

2. 检查卡的每个孔是否有两个亮兰色的斑点。未曾使用的卡每个孔内有两个浅兰色的斑点,加入样品后会自动消失。

3. 用移液器吸取500ul纯化及稀释过的液体,加入到速测卡膜的中间,使其透过膜(见附图1. 这一过程需要的时间不会超过5分钟)

4. 当滤液透过膜后,加入100ul准备好的酶标记物复溶液到膜的中间, 使其透过膜

5. 当酶标记物透过膜后, 加入100ul洗涤缓冲液(绿色标签) 到膜的中间,使其透过膜,然后用柔软的吸水纸(优质纸手巾)沿孔的周围擦拭 

6. 加入100ul底物(兰色标签)到膜的中间,反应5分钟,加入底物后开始记时(严格控制反应时间)

7. 加入100ul停止液(黄色标签) 到膜的中间,当停止液透过膜后立即判读结果

判读测定结果

为了获得一个有效的测定结果,质控斑点必须变成清晰可见的紫色。样品斑点与质控斑点颜色的强度不必一样。

当样品斑点与质控斑点都有清晰可见的颜色产生,样品应当判断为阴性(小于所选择的检测限)

当样品斑点没有产生易见的颜色,应当判断为阳性(大于所选择的检测限)

成功使用AFLACARD TOTAL速测卡指南

试剂盒在使用之前回升至室温(20-28OC),需要至少30分钟

酶标记物复溶后至使用前在室温(20-28OC)放置至少30分钟, 以混合均匀

每次吸样或吸试剂必须使用新的移液器吸头,吸头不能反复使用,应使用高质量的吸头

确认加入到膜上的底物中没有气泡

在孵育反应5分钟步骤,请使用记时器

以上为永远遵循的要点,永远!

参考文献略

 r-Biopharm拜发公司, r-Biopharm Rhone LTD拜发罗恩公司

 各种霉菌毒素检测试剂盒及免疫亲和柱

AFLACARD B1黄曲霉毒素B1 快速检测卡 检测限可调整为2,5,10,15,20ppb

Kobra Cell黄曲霉毒素B1,G1, 分析仪4秒钟得到结果

AFLAPLATE B1黄曲霉毒素B1 ELISA 试剂盒 单克隆抗体(1.5-50ppb)

AFLASCAN黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)单克隆抗体免疫亲和柱,半定量目测

AFLAPREP单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化,窄范围0-200ppb,检测限小于0.5ppb

EASI-EXTRACT AFLATOXIN单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测总黄曲霉毒素的样品纯化

总黄曲霉毒素单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化

总黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2,M1,M2)单克隆抗体ELISA方法

黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2) 快速检测(15分钟)ELISA方法

黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2) 特快速检测  (5分钟) 半定量分析, ELISA方法

黄曲霉毒素B1 高灵敏度,检测限为0.625ppb, ELISA方法

AFLAPREP M单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测乳品中黄曲霉毒素M1的样品纯化,检测限小于5ppt

乳制品中的黄曲霉毒素 M1  高灵敏度), ELISA方法

乳制品中的黄曲霉毒素M1快速检测(15分钟), ELISA 方法

T - 2 毒素 高灵敏度), 单克隆抗体ELISA方法

T毒素快速检测 (15分钟), 单克隆抗体ELISA方法

FUMONIPREP伏马菌毒素单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测伏马菌毒素的样品纯化,范围100ppb-15000ppb

FUMONIPLATE伏马菌毒素, ELISA方法, 单克隆抗体

(0. 3-10ppm)

伏马菌毒素高灵敏度), ELISA方法

伏马菌毒素快速检测(15分钟), ELISA方法

赭曲霉毒素高灵敏度), ELISA方法

赭曲霉毒素快速检测(15分钟),单克隆抗体ELISA方法

赭曲霉毒素A单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测赭曲霉毒素 A 的样品纯化

OCHRAPREP单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测赭曲霉毒素 A 的样品纯化, 检测范围1-1000ppb, 检测限小于1ppb

OCHRASCAN 免疫亲和柱,半定量目测,检测限2ppb

玉米赤霉烯酮 高灵敏度), ELISA方法

玉米赤霉烯酮快速检测(15分钟),单克隆抗体ELISA方法

EASI-EXTRACT ZEARALENONE玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,用于检测玉米赤霉烯酮样品纯化

脱氧雪腐镰刀菌烯醇 高灵敏度), 单克隆抗体ELISA方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇快速检测 (15分钟), ELISA方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇特快速检测  (5分钟) 半定量分析, ELISA方法

红曲霉染色剂中的桔霉毒素快速检测(15分钟), ELISA方法

 

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