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黄曲霉毒素B1检测卡

简要描述:

试剂盒组成,可以进行20个样品的测定10 个卡 密封于铝箔袋中,每卡可以测定两个样品20个样品纯化柱20个样品瓶,每瓶含有3ml样品稀释缓冲液1瓶洗涤缓冲液,4ml 绿色标签1瓶停止液,4ml 黄色标签2 个安瓶,含有冷冻干燥的酶标记物,红色标签1瓶酶标记物稀释缓冲液,5ml 粉色标签1个安瓶,含有5ml 底物,兰色标签20个滤液收集管

更新时间:2017-07-19

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黄曲霉毒素B1检测卡

黄曲霉毒素B1检测卡

订货号: P27
产品名称: 黄曲霉毒素B1 快速检测卡
产品英文名称: AFLACARD B1
包装: 20次检测
产品介绍: 如下
产品说明: 黄曲霉毒素B1 快速检测卡 检测限可调整为2,5,10,15,20ppb
速测卡定性测定黄曲霉毒素B1,检测限为2,5,10,15或20ppb

使用说明书,使用前请仔细阅读,中文翻译件仅供参考

产品编号P27

试剂盒组成,可以进行20个样品的测定

10 个卡 密封于铝箔袋中,每卡可以测定两个样品

20个样品纯化柱

20个样品瓶,每瓶含有3ml样品稀释缓冲液

1瓶洗涤缓冲液,4ml 绿色标签

1瓶停止液,4ml 黄色标签

个安瓶,含有冷冻干燥的酶标记物,红色标签

1瓶酶标记物稀释缓冲液,5ml 粉色标签

1个安瓶,含有5ml 底物,兰色标签

20个滤液收集管

需要的材料但盒子中不提供

实验室天平

刀片式均质器,带有1L容器罐

蒸馏水或去离子水

色谱级甲醇

Whatman N0113或 N04滤纸(可用国产定性或定量滤纸替代)

100ul, 0.5-1.0ml移液器及匹配的吸头

实验室玻璃容器

过滤漏斗

100ml及500ml量筒

烧杯

重要注意事项

危险性

黄曲霉毒素是非常有害的物质,在实验中应当自始致终穿戴保护服装,包括橡胶手套,安全眼镜,实验大褂.

所有使用过的材料及试剂必须经过次氯酸钠溶液(约5%W/W)浸泡至少30分钟,然后加入丙酮(5%V/V) 再浸泡30分钟.以达到消毒的目的. 重复使用的实验用具应当用清水冲洗干净后用蒸馏水彻底洗涤.

可用本试剂卡检测的样品

花生,谷物,饲料,中草药及调味品

特别提示

1.不要使用过了有效期的试剂盒

2.不要混用不同批号的试剂,不要使用其他厂商的试剂代替.

3.试剂盒在使用之前应当回至室温(20-28OC),需要至少30分钟

4.避免试剂长时间在室温放置,取出所需要的试剂后,其余应立 

  即密封好放回2-8OC

5.如果孵育时间与要求的不符,会导致结果不准确. 

6.移液器吸头在使用之前应当用原液润湿

7.蒸馏水温度应当为室温(20-28OC)

储存

试剂盒应当在2-8OC保存,不要冷冻

效期

如果试剂盒是在2-8OC保存, 自生产之日起有十个月的效期。酶标记物复溶后在2-8OC保存,可稳定4个月

样品制备

应当按照认可的正式取样程序取样,以获得有代表性的样品。推荐zui少粉碎1公斤有代表性的样品,其中50g用于样品提取

用途及原理

AFLACARD B1速测卡是定性酶联免疫方法。这个筛选方法用于检测黄曲霉毒素B1的含量是否等于或大于2,5,10,15或20ppb。

由于耗时长,成本高,传统的黄曲霉毒素B1检测方法已经不适应产品的常规检测。速测卡由于采用了单克隆抗体技术,因而具有特异性好,灵敏度高,快速,简单等优点

检测卡的关键组份是单克隆抗体联接在卡的膜上。接下来是毒素提取,样品稀释,纯化及透过卡膜。样品中的黄曲霉毒素B1被膜上的抗体结合,剩余的抗体空位与后加入的黄曲霉毒素B1酶标记物结合。当样品中的黄曲霉毒素B1增加时,剩余的抗体空位就会减少。然后洗涤膜以除去未结合的酶标记物。加入底物后,膜上结合有酶标记物的地方会显现紫色斑点。用于质控的紫色斑点确认实验进行正确。样品紫色斑点产生表明是阴性样品。加入反应停止液后,颜色反应会停止并留下*的实验记录(保存在黑暗处)。

测定程序

酶标记物的准备

加2ml酶标记物稀释缓冲液(粉色标签)到含有酶标记物的安瓶中(红色标签),复溶后使用前在室温(20-28OC)放置至少30分钟。如果不能当日消耗完,请转移到另一干净棕色可密封的瓶中,标记好内含物及复溶日期,在2-8OC保存。

酶标记物复溶后在2-8OC保存,可稳定4个月

样品提取

称50g精细粉碎了的样品,放入具有1L容量的均质器中。加入100ml 80%的甲醇水溶液(色谱级甲醇/蒸馏水 80/20 V/V)。高速均质2分钟。用滤纸过滤提取物,收集至少2 ml滤液。

根据需要的检测限,按表1取适量的滤液及 80%甲醇加入到稀释管中,颠倒数次混合好。取1ml稀释了的滤液转移到含有3ml样品稀释缓冲液的小瓶中,颠倒小瓶数次混合好瓶中液体。将小瓶中液体全部加入纯化柱中(盒中已提供),用活塞加压滴速通过纯化柱并收集纯化液于收集管中(盒中已提供)。如果纯化液不清亮,请用同一根柱子再次过柱,但要降低速度。此液可以用AFLACARD B1检测卡测定。

表1 

稀释体积

要求的检测限

2ppb

5ppb

10ppb

15ppb

20ppb

30ppb

被稀释液体积

1ml

1ml

1ml

1ml

1ml

0.5ml

80%甲醇体积

_

1.5ml

4ml

6.5ml

9ml

7ml

AFLACARD B1检测卡测定程序

注意:未曾使用的卡每个孔内有两个浅兰色的斑点,加入样品后会自动消失。每个孔分别含有样品区和质控区各一个,因此每卡可以测定两个样品。

1. 试剂盒在使用之前从冰箱中拿出,回升至室温(20-28OC),需要至少30分钟

2. 检查卡的每个孔是否有两个浅兰色的斑点

3. 用移液器吸取500ul纯化过的滤液,加入到速测卡膜的中间,使其透过膜(见附图1. 这一过程需要的时间不会超过5分钟)

4. 当滤液透过膜后,加入100ul准备好的酶标记物复溶液到膜的中间, 使其透过膜

5. 当酶标记物透过膜后, 加入100ul洗涤缓冲液(绿色标签) 到膜的中间,使其透过膜,然后用柔软的吸水纸(优质纸手巾)沿孔的周围擦拭 

6. 加入100ul底物(兰色标签)到膜的中间,反应5分钟,加入底物后开始记时(严格控制反映时间)

7. 加入100ul停止液(黄色标签) 到膜的中间,当停止液透过膜后立即判读结果

注意:未曾使用的卡每个孔内有两个浅兰色的斑点,加入样品后会自动消失。

提醒:每卡可以测定两个样品,每孔测定一个样品。每孔有自己的内置质控

请注意:第二个孔必须在*个孔用后的8小时内使用。

判读测定结果

为了获得一个有效的测定结果,质控斑点必须变成清晰可见的紫色。样品斑点与质控斑点颜色的强度不必一样。

当样品斑点与质控斑点都有清晰可见的颜色产生,样品应当判断为是阴性;当样品斑点没有产生易见的颜色,应当判断为阳性

成功使用AFLACARD B1检测卡指南

试剂盒在使用之前回升至室温(20-28OC),需要至少30分钟

酶标记物复溶后至使用前在室温(20-28OC)放置至少30分钟,以混合均匀。

每次吸样或吸试剂必须使用新的移液器吸头,吸头不能反复使用,应使用高质量的吸头

确认加入到膜上的底物中没有气泡

在孵育反应5分钟步骤,请使用记时器

以上为永远遵循的要点,永远!

参考文献略

 r-Biopharm拜发公司, r-Biopharm Rhone LTD拜发罗恩公司

 各种霉菌毒素检测试剂盒及免疫亲和柱

AFLACARD TOTAL总黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)快速检测卡 检测限可调整为4,5,10,15,20,30ppb

Kobra Cell黄曲霉毒素B1,G1, 分析仪4秒钟得到结果

AFLAPLATE B1黄曲霉毒素B1 ELISA 试剂盒 单克隆抗体(1.5-50ppb)

AFLASCAN黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2)单克隆抗体免疫亲和柱,半定量目测

AFLAPREP单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化,窄范围0-200ppb,检测限小于0.5ppb

EASI-EXTRACT AFLATOXIN单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化,宽范围, 检测限

黄曲霉毒素单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测黄曲霉毒素的样品纯化

黄曲霉毒素总量 (B1,B2,G1,G2,M1,M2)单克隆抗体ELISA方法

黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2) 快速检测(15分钟)ELISA方法

黄曲霉毒素(B1,B2,G1,G2) 特快速检测  (5分钟) 半定量分析, ELISA方法

黄曲霉毒素B1 高灵敏度,检测限为0.625ppb, ELISA方法

AFLAPREP M单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测乳品中黄曲霉毒素M1的样品纯化,检测限小于5ppt

乳制品中的黄曲霉毒素 M1  高灵敏度), ELISA方法

乳制品中的黄曲霉毒素M1快速检测(15分钟), ELISA 方法

T - 2 毒素 高灵敏度), 单克隆抗体ELISA方法

T毒素快速检测 (15分钟), 单克隆抗体ELISA方法

FUMONIPREP伏马菌毒素单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测伏马菌毒素的样品纯化,范围100ppb-15000ppb

FUMONIPLATE伏马菌毒素, ELISA方法, 单克隆抗体

(0. 3-10ppm)

伏马菌毒素高灵敏度), ELISA方法

伏马菌毒素快速检测(15分钟), ELISA方法

赭曲霉毒素高灵敏度), ELISA方法

赭曲霉毒素快速检测(15分钟),单克隆抗体ELISA方法

赭曲霉毒素A单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测赭曲霉毒素 A 的样品纯化

OCHRAPREP单克隆抗体免疫亲和柱,用于检测赭曲霉毒素 A 的样品纯化, 检测范围1-1000ppb, 检测限小于1ppb

OCHRASCAN 免疫亲和柱,半定量目测,检测限2ppb

玉米赤霉烯酮 高灵敏度), ELISA方法

玉米赤霉烯酮快速检测(15分钟),单克隆抗体ELISA方法

EASI-EXTRACT ZEARALENONE玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,用于检测玉米赤霉烯酮样品纯化

脱氧雪腐镰刀菌烯醇 高灵敏度), 单克隆抗体ELISA方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇快速检测 (15分钟), ELISA方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇特快速检测  (5分钟) 半定量分析, ELISA方法

红曲霉染色剂中的桔霉毒素快速检测(15分钟), ELISA方法

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